Mikrobiologi

Bioburden

ALS erbjuder bioburden (totalantalsbestämning) genom att kvantitativt bestämma antalet viabla aeroba mikroorganismer, jäst och mögel i eller på läkemedel och medical device. Detta är ett bra sätt att kontrollera produktionshygien, få en uppfattning om mikrobiell kontamination, dess ursprung och karaktär. Analysen används också för att påvisa att produkten eller produktionslinjen uppfyller internt och externt fastställda gränsvärden för aktuell produkt/produktion. Metoderna är utformade i enlighet med gällande farmakopé.

Vanliga provtagningsställen

• Bulkproduktion
• Råmaterial
• Sluttest för frisläppning

Läs mer om medical devices här.

Sterilkontroll

ALS erbjuder sterilkontroll. Kvalitativ analysmetod utförs på aseptiskt fyllda eller på slutsteriliserade produkter. På ALS utför vi sterilkontroll i vårt nya renrum. Provsättningen sker i ”EU-GMP-Klass-A” LAF-bänk med omgivande klass-B yta. Vi har en validerad genomräckningsautoklav för enklare inslussning av material och utensilier. Vårt renrum är auditerat av Läkemedelsverket, Swedac samt amerikanska FDA. Sterilkontroll görs antigen via direktinokulering eller med membranfiltreringsmetod.

Direktinokulering

• Produkten inokuleras direkt i två olika typer av odlingsmedia: ett som stödjer tillväxt av aeroba bakterier och ett för anaeroba bakterier.
• Proverna inkuberas under 14 dagar.
• Metoden är lämplig för produkter som är svåra att filtrera eller där endast små volymer finns tillgängliga.

Membranfiltrering

• Produkten filtreras genom ett membran som fångar upp mikrobiella föroreningar.
• Filtren sköljs för att avlägsna inhibitorer och produktrester innan de inkuberas i två olika typer av media under 14 dagar.
• Metoden är väl lämpad för större volymer och produkter med inhibitorer som kan störa mikrobiell tillväxt.

Endotoxinanalys

ALS erbjuder endotoxintestning (LAL-test) kontrollerar att injicerbara läkemedel är säkra för patienter.

Bakteriella endotoxiner är lipopolysackarider (LPS), komponenter av Gram-negativa bakteriella cellväggar och kända för att orsaka feber och sjukdomar när de injiceras i blodomloppet. Bakteriella endotoxiner är värmestabila och dess toxicitet är inte beroende av närvaron av den viabla bakteriella cellen.

Endotoxintest (LAL) Gel-Clot Metoden 

Vi på ALS har olika typer av endotoxinanalys med Gel-clot metoden, kvalitativ respektive semikvantitativ. Våra endotoxinanalyser går ut på att man använder sig utav ett lysat med känd känslighet t.ex. 0,03 EU/ml lysat. Detta innebär att lysatet reagerar när endotoxinhalten är 0,03 EU/ml och uppåt. Det som händer är att resultatet av en kaskadreaktion bildar en gel som är detekterbar. Detta är en kvalitativ metod.

Man kan utveckla denna till en semikvantitativ metod genom att späda produkten, på så sätt kan man mera bestämma var brytpunkten finns för gelbildning respektive inte gelbildning. Varje prov analyseras i dubbletter och spikas i dubbletter. Standardkurvan görs alltid vid semikvantitativ analys.

Endotoxintest (LAL) Kinetisk MCS

Endosafe® MCS är ett endotoxin detektionssystem som använder FDA-licensierade Endosafe® PTS patroner och fem stycken spektrofotometrar för att ge kvantitativa resultat av bakteriellt endotoxin på ca 15 minuter. Kvantitativa LAL-resultat redovisas via mjukvaran endosvan V® programvara som är 21 CFR kompatibel för läkemedel och Medical Device.

MCS använder LAL kinetisk kromogen metod som mäter färgintensitet i relation till koncentrationen av endotoxin prov. Engångspatroner används för att köra analysen innehållande exakta mängder av LAL-reagens, kromogent substrat och kontroll endotoxin (CSE).

MCS är ett instrument som kvantitativt mäter bakteriellt endotoxin (BET) hos gramnegativa bakterier. Mätningen går ut på att instrumentet mäter ljusgenomträngligheten eller ”gulheten” hos ett prov med hjälp av spektrofotometri. Till detta instrument används patroner som är förapterade med endotoxin.

Täthetstest - CCIT

ALS erbjuder två varianter av täthetstest för förpackningar (Container Closure Integrity Test) syftet med testerna är att säkerställa att förpackningar och deras förslutning är täta och inte genomsläppliga för mikroorganismer respektive färglösning.

Bakteriologiskt täthetstest

Förpackningar fylls med odlingsmedium, nedsänks i en bakterielösning och utsätts för tryck/vakuum, varefter de inkuberas och inspekteras för eventuell växt.

Täthetstest blåbad

Förpackningar sänks ner i en vätska med lösning av kristallviolett och utsätts för tryck och vakuum. Förpackningarna undersöks sedan för att se om vätskan läkt in i förpackningarna. Metoden kan utföras både med tomma förpackningar och förpackningar som först fyllts med en färglös vätska. 

Representativt provuttag

För att få ett rättvisande resultat är det viktigt att ta ut ett representativt antal förpackningar som grund till beslut kan ISO 2859-1 ligga.

Vanliga förpackningar som testas:

• Vialer
• Ampuller
• Sprutor

Renrumsvalidering

ALS i Sollentuna utför kvalificering av renrum med hjälp av mikrobiologisk utvärdering och partikelmätning.

• Ackrediterad provtagning och analys
• Upprättande av kontrollplan
• Upprättande av testplan och protokoll 
• Upprättande av styrande instruktioner

Belastningstest

Belastningstest är en kvantitativ metod för att mäta effekten i ett konserveringsmedel i produkter som kosmetika, diagnostiska kit och läkemedel. Produkten inokuleras med bestämda typer och bestämt antal mikroorganismer. Bedömning av produktens konserverande effekt, sker med avseende på reduktion av inokulerade viabla mikroorganismer av känd mängd.

Det är viktigt att specificera vilken typ av produkt samt enligt vilken farmakopé testet skall utföras då de bestämmer gränser och uttag för belastningsstudien.

Omgivningshygien

ALS  erbjuder en ackrediterad och kvalitetssäkrad mikrobiologisk monitorering av renrum, med särskilt fokus på det slutgiltiga steget i processen, från inkubering, avläsning och rapportering. 

Vi ansvarar för inkubering och mikrobiologisk avläsning av bland annat yt- och luftprover enligt gällande krav och standarder. All analys sker inom vårt ackrediterade laboratorium och ger tydliga och tillförlitliga analysresultat för uppföljning av hygienstatus och uppfyller regulatoriska krav. 

 

Tilläggstjänster vid avläsning:

• Grovtypning av isolat inför vidare identifiering (gramtillhörighet och oxidastest) 
• Identifiering med MALDI-TOF sekvensering 
• Konsultation vid validering och uppföljning av renrum 

Provtagning och validering utförs av erfaren ALS laboratoriepersonal. 

För kunder som önskar en komplett lösning inom omgivningshygien samverkar ALS med etablerade samarbetspartners för övriga delar av processen, vilket säkerställer ett sammanhängande, kvalitetssäkrat och effektivt arbetsflöde. 

Kontakta oss gärna för att diskutera hur vi kan anpassa upplägget efter era behov. 

Mycoplasma Testing

ALS kan identifiera kontaminering av mycoplasma i läkemedel inom en arbetsdag. Den snabbhet och precision som qPCR-tekniken (kvantitativ PCR) erbjuder gör vårt MycoSEQ™ Plus Mycoplasma Detection Kit till ett effektivare alternativ jämfört med traditionella odlingsbaserade metoder.

Mycoplasmatestning är ett regulatoriskt krav från globala myndigheter som FDA och EMA. Vid cellbaserad läkemedelsframställning kan mycoplasma utgöra en kvalitets- och säkerhetsrisk som påverkar cellens fysikalisk-kemiska egenskaper, och kan även minska produktionsmängd och effektivisering i tillverkningsprocessen.

Våra PCR-baserade metoder följer riktlinjer från USP Chapter <1125> "Nucleic Acid-Based Techniques—General" och Ph. Eur Chapter 2.6.21 "Nucleic Acid Amplification Techniques", vilket säkerställer hög kvalitet och pålitlighet i testprocessen.

 

Specifika Mikroorganismer

ALS erbjuder kvalitativ analys i läkemedel och medical device för att säkerställa frånvaro av specifika mikroorganismer. Dessa analyser tillsammans med totalhaltsbestämning används ofta för att frisläppa produkter till marknaden. Metoderna är utformade i enlighet frisläppning

• Staphylococcus aureus
• Pseudomonas aeruginosa
• Escherichia coli
• Salmonella
• Candida albicans
• Bile-tolerant gramnegativ bacteria